ИЗУЧЕНИЕ АНТИФУНГАЛЬНЫХ СВОЙСТВ ОБРАЗЦА
Veratin Micotin anti-fungal feet gel
Для оценки антифунгальной активности образцов препаратов использовали следующийтест-штамм –
Candida albicans АТСС 885/653 (Кандида альбиканс), а также клинические образцы, полученные от больных с
грибковыми поражениями.
Отбор клинического материала и бактериологические исследования проводили согласно Приказу No 535
МОЗ СССР от 22.04.1985 "Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования,
применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений" [Электронный
ресурс] / –Режим доступа:http://base.garant.ru/4171962/. Идентификацию выделенных культур микроорганизмов
осуществляли за морфологическими, тинкториальними, культуральными, биохимическими свойствами согласно
"Определителю бактерий Берджи", 2009г.
Приготовление микробной суспензии микроорганизмов проводили с использованием прибора Densi-La-
Meter (производствоPLIVA-Lachema, Чехия; длина волны 540 нм). Суспензию готовили согласно инструкции,
которая прилагается к прибору и информационного письма о нововведении в системе охраны здоровья No 163-2006
“Стандартизація приготування мікробних суспензій”, г. Киев. Синхронизацию культур проводили с
использованием низкой температуры (4
оС). Микробная нагрузка составляла 10
7 микробных клеток на 1 мл среды
и устанавливалась за стандартом McFarland. В работу брали18-24 часовую культуру микроорганизмов. Для
исследований использовали агар Сабуро-декстрозный («HIMediaLaboratorlesPvt.LtdIndia» срок годности среды до
ХII 2019 г, Производство Индия).
Метод диффузии препарата в агар проводили «колодцами». Определение активности
антибактериальных препаратов проводили на двух слоях плотной питательной среды, разлитой в чашки Петри. В
нижнем слое использовали «голодные» не засеянные среды (агар-агар, вода, соли). Нижний слой представляет
собой подложку с 10 мл «голодного агара», на которую строго горизонтально устанавливают 3-6 тонкостенных
цилиндра из нержавеющей стали диаметром 10 мм и высотой 10 мм. Вокруг цилиндров заливают верхний слой,
состоящий из питательной агаризованной среды, расплавленной и охлажденной до 40
0С в которую вносили
соответствующий стандарт суточной культуры тест-микроба. Предварительно, верхний слой хорошо
перемешивался до образования однородной массы. После застывания цилиндры стерильным пинцетом извлекали и
в образовавшиеся лунки помещали испытуемое вещество с учетом его объема (0,25 - 0,3 мл).
Объем среды для верхнего слоя колебался от 14 до 16 мл. Чашки подсушивали 30-40 мин. при
комнатной температуре и ставили в термостат на 18-24 часа.
При оценке новых антибактериальных веществ, а также при изучении антибиотикоустойчивых штаммов
применяют следующие критерии:
- отсутствие зон задержки роста микроорганизмов вокруг лунки, а также зоны задержки до 10 мм
указывает на то, что микроорганизм не чувствителен к внесенному в лунку препарату или концентрации
антибиотика;
- зоны задержки роста диаметром 10-15 мм указывают на малую чувствительность культуры к
испытываемой концентрации антибактериального вещества;
- зоны задержки роста диаметром 15-25 мм расцениваются, как показатель чувствительности
микроорганизма к испытываемому лекарственному средству;
- зоны задержки роста, диаметр которых превышает 25 мм, свидетельствует о высокой чувствительности
микроорганизмов к изучаемым препаратам.
Данные результатов исследования антибактериальной активности исследуемых образцов представлены в
таблице 1 и 2.
Таблица 1 «Антифунгальная активность исследуемого образца»
Образец No1
Диаметры зон задержки роста в мм
число повторов опыта n=3
Candida albicans АТСС 885/653
Veratin Micotin anti-fungal feet gel 27, 28, 28
Candida albicans АТСС 885/653 (Кандида альбиканс)
Таблица 2 «Антифунгальная активность исследуемого образца к клиническим штаммам»
Образец No1
Диаметры зон задержки роста в мм число повторов опыта n=3
Candida
albicans 57
Candida
albicans No
41
Aspergillus
niger 39
Epidermophyton
floccosum 72
Microsporum
gypsum 93
Veratin
Micotin anti-
fungal feet
gel
23, 24, 24 25, 26, 26 23, 24, 23 23, 23, 24 25, 24, 26
Результаты исследований показали, что препарат Veratin Micotinanti-fungalfeetgel обладает
антифунгальными в отношении широкого спектрагрибов, а диаметры зон задержки роста составляют от 23 до
28мм.
Candida albicans 57 - клинический штамм, выделенный от больной Т. 27 лет из вагинального секрета,
диагноз –бактериальный вагинит. Штамм чувствительный к флуконазолу, орунгалу, слабочувствительный к
низоралу, нистатиту. Среднеадгезивный.
Candida albicans No 41 – клинический штамм, выделенныйот больного Г. 49 лет из ротовой полости,
диагноз – стоматит. Штамм чувствительный к флуконазолу, нистатиту, орунгалу, пимафуцину. Среднеадгезивный.
Aspergillus niger 39- клинический штамм выделенный от больной Л. 58 лет из мокроты, диагноз –
хроническая пневмония. Штамм чувствительный к интраконазолу, слабочувствительный к флуконазолу,
клотримазолу. Среднеадгезивный.
Epidermophyton floccosum 72 - клинический штамм выделенный от больного М. 68 лет с кожных покровов,
диагноз – эпидермофития стоп. Штамм чувствительный флуконазолу, орунгалу, пимафуцину,
слабочувствительный к нистатиту, клотримазолу, низоралу. Среднеадгезивный.
Microsporumgypsum 93 - клинический штамм, выделенный от больного О. 69 лет с кожных покровов,
диагноз – паховая дермофития. Штамм чувствительный к флуконазолу, орнидозолу. Среднеадгезивный.
СПИСОК НОРМАТИВНЫХ ДОКУМЕНТОВ
Бактеріологічний контроль поживних середовищ.Інформаційний лист МОЗ України No 05.4.1/1670, Київ,
2001.
Методичні рекомендації “ Вивчення специфічної активності протимікробних лікарських засобів” Київ 2004
– 38.
Методичні вказівки “Визначення чутливості мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів” МОЗ
України, Київ 2007, No МВ 9.9.5-143-2007.
“Визначення чутливості мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів” Наказ МОЗ України No 167 від
05.04.2007.
Державна Фармокопея України, 2001 р.
Исследование образца Veratin Micotin anti-fungal feet gelпроводил: зав. лаборатории биохимии и
биотехнологии
ГУ “ИМИ НАМН”к. б. н., ст. н. с Т. П. Осолодченко